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化學發光試劑的配置

日期:2016-09-22瀏覽:978次

  詳細介紹核心知識.化學發光試劑的配置 在使用前等量混合A液和B液,混合后盡快使用。將膜片置混合液中于室溫下振蕩溫育2分鐘,每平方厘米膜片至少使用0.1-0.2ml以覆蓋全膜片。蛋白信號顯現
.用平頭鑷鉗住膜片,垂直置于吸水紙以吸去過量試劑。置膜片于二層保鮮膜之間,小心趕盡氣泡。將膜片吸附蛋白面朝上,置于X光片盒中。于暗室中壓上X光片。根據信號的強弱適當調整曝光時間,一般為1min或5min,也可選擇不同時間多次壓片,以達*效果。顯影沖洗。調節曝光時間,再次曝光顯影。
    化學發光試劑本試劑是非放射性發光系統,用于檢測固定在膜上的蛋白,其敏感性達1-5pg。用X光片可快速地獲得*的硬拷貝結果。所含獨特的底物足以維持12小時以上的發光,便于反復曝光操作,免疫印跡膜經抗體脫卸處理后可供再次抗體探查使用。適用于痕量蛋白或核酸檢測。
  化學發光試劑原理:辣根過氧化酶使試劑中的發光物(Luminol)氧化并發光,而試劑中含有增強劑這使得發光增強了1000倍。在免疫印跡中,將復雜的蛋白混合物經SDS-PAGE分離,并轉移到固相膜上(如NC、PVDF)等,用于免疫學檢測,經HRP標記的抗體與膜上的蛋白直接(標記一抗)或間接(標記二抗)反應。當加入免疫印跡化學發光試劑后,Luminol發生氧化降解,并發射波長為428nm的光,此光可經X光膠片(放射自顯影片)感光記錄下來。更多相關知識,可以與本公司.

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