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巴氏染色液染色步驟

日期:2016-08-18瀏覽:1001次

 本文內容為您介紹產品的核心知識.巴氏染色液為了防止細胞污染,凡是使用過的固定液,必須過濾后才能再使用。使用過長的固定液,必須用酒精相對密度計測定,酒精濃度低于90%時應該及時更換新液。濕固定的重要性:標本再新鮮時及時固定時保證染色效果的重要因素。如蘇木素對細胞核的染色,巴氏染色中胞漿的特殊著色作用,均可因標本干燥后固定而大受影響。制片標本的郵寄:標本再固定15min后取出,立即加甘油數滴于制片上,裝入密封的小盒中。實驗室在收到標本后,先浸入95%酒精中,使甘油溶去,再進行染色。
  巴氏染色液染色的zui后一步是透明,使細胞的色度與細胞的重疊不致影響鏡下檢查。這是在脫水與制片封固之間的一項重要步驟。zui常用的透明溶劑使二甲苯,二甲苯的折射率在1.494,載玻片的折射率在1.515,兩者較為匹配。如果二甲苯溶液出現顏色或變得渾濁,一定要更換新液.巴氏染色操作流程 95%乙醇固定(15min)→清水沖洗多次→蘇木素染液(3-5min)→清水沖洗三次→藍化→95%乙醇漂洗→橙黃染液(1-10s)→95%乙醇漂洗→95%乙醇漂洗→100%乙醇漂洗→EA50(3-5m)→95%乙醇漂洗→95%乙醇漂洗→無水乙醇漂洗→無水乙醇(2min)→二甲苯(2min)→中性樹膠封片。
  巴氏染色液對于不同的標本需要不同的固定方法。zui為常用的固定方法是95%酒精作為固定液的濕固定法。酒精作為一種脫水劑能夠防止細胞內的酶捋蛋白質分解而自容,并凝固細胞內的物質如蛋白質、脂肪和糖類等,使其保持與組織生活相仿的成分,從而使細胞各部分,尤其核染色質易于著色。對于巴氏染色來說,酒精固定zui為重要的。如果酒精濃度不足引起的固定不佳,可造成細胞的人為變化,并可導致假陽性或假陰性的診斷。更多相關知識,請咨詢本公司.

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