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化學發光試劑分析生物的原理

日期:2016-08-11瀏覽:1083次

 本文為您詳細介紹以下知識.有機化合物的化學發光試劑,有機化合物的同系物結構和性質相似,使單一組分的測定碰到困難,因此有機化合物同系物的分析常與 HPLC 相結合。有機酸的化學發光分析 ( 見表 3) ,一般是先將其衍天生熒光物質經色譜分離后進行化學發光檢測。但衍生法有如下的缺點 : (1) 衍生反應不完全 ; (2) 衍生物穩定性差,要求及時檢測 ; (3) 限制了分離方法和條件的選擇。由于衍生產物的性質與待測物不同,導致分離效率和分辨率下降,同時增加分析的時間和勞動強度。在臨床醫學上,草酸是一個重要的檢測項目,可以直接用氧化化學發光反應測定尿液和草酸二乙酯中的草酸鹽及游離的草酸。另外還可以測定苯酮尿癥病人的尿液的苯丙酮酸的含量,方法是先在堿性條件下將苯丙酮酸氧化成 1 , 22 二氧雜環丁烷類化合物,然后裂解產生化學發光。另外可以將 Fe ( III )草酸配合物光解得到 Fe (II ) ,催化魯米諾-過氧化氫化學發光反應,此法線性范圍為 0 . 1 ~ 100uM 。此外酶聯偶合反應也可以用于某些有機酸的化學發光分析。
   有機堿化學發光試劑,胺類化合物*離子化電勢呈如下規律 : 伯胺 > 仲胺 > 叔胺,并隨碳鏈增長,離子化電勢逐漸下降,因此叔胺化合物的檢測限較低,達 0 . 28 pM 。胺類化合物的分析 ( 見表 4) ,較多的是經柱前衍生天生熒光衍生物,分離后用過氧草酸鹽化學發光體系檢測,也可將其天生希夫堿或其它產物氧化而發光。有些堿如腎上腺素等可直接氧化而發光。通常有一個經驗規則,假如一物質具有熒光或其反應產物有熒光,該物質一般可發生化學發光反應,但也有例外。嘌呤堿是核酸的基礎物質,因此對嘌呤堿的分析測定將推動 DNA 分析方法的發展。在酸性醇液中腺嘌呤與苯甲醛反應,然后用過氧化氫氧化反應產生化學發光,此法具有很好的選擇性,線性范圍為 1 . 5×10 - 7 ~ 5 . 0×10 - 7 M ,用此法測定鳥嘌呤靈敏度比熒光法高 20 倍。
   氨基酸化學發光試劑,氨基酸分析方法的改進有利于推動生物技術、基因工程、 DNA 重組和基因克隆等的發展。由于盡大多數氨基酸沒有內源熒光特性,因此用過氧草酸鹽體系測定氨基酸需將其衍天生熒光物質,但此法避免不了衍生法所固有的缺點。此外亦可通過測定氨基酸與氨基酸氧化酶反應產生的過氧化氫來測定氨基酸的含量,如 L 2 氨基酸經反相色譜柱分離后流經 L 2 氨基酸氧化酶反應器產生過氧化氫,然后用過氧草酸鹽體系檢測。氨基酸與 Ru (b ipy) 3+3 反應,用活動注射化學發光法檢測,相對于脯氨酸和天冬酰胺檢測限可分別達到 20 pmo l 和 50 pmo l 。一般來說,仲胺反應產生的的發光強度比伯胺大。對氨基酸上取代基性質研究表明,給電子基有利于增強化學發光強度。更多相關產品,請咨詢本.
 

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