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化學發光試劑使用方法

日期:2016-06-17瀏覽:1287次

化學發光試劑使用方法:  
1.印跡膜制備按常規方法完成SDS-PAGE和電轉膜操作,適當的封閉非常重要??梢酝ㄟ^標記一抗或二抗的手段引入HRP,一般采用市售的HRP二抗交聯物。仔細地淋洗對于降低背景非常重要,在與HRP交聯物溫育后,膜片更需仔細洗滌,所有步驟均在室溫下完成。  
2.化學發光試劑的配置在使用前等量混合A液和B液,混合后盡快使用。將膜片置混合液中于室溫下振蕩溫育2分鐘,每平方厘米膜片至少使用0.1-0.2ml以覆蓋全膜片。  
3.蛋白信號顯現  
1).用平頭鑷鉗住膜片,垂直置于吸水紙以吸去過量試劑。  
2).置膜片于二層保鮮膜之間,小心趕盡氣泡。  
3).將膜片吸附蛋白面朝上,置于X光片盒中。  
4).于暗室中壓上X光片。  
5).根據信號的強弱適當調整曝光時間,一般為1min或5min,也可選擇不同時間多次壓片,以達*效果。顯影沖洗。  
6).調節曝光時間,再次曝光顯影。

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